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食品及飲料行業

恒溫熒光法試劑盒快速篩選、鑒定創傷弧菌解決方案

一、技術原理:

    試劑盒基于恒溫熒光法檢測,利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶,使模板兩端引物結合處循環出現環狀單鏈結構,引物順利與模板結合并進行鏈置換擴增反應,實現在恒溫條件下(60-65℃)進行連續快速擴增。

    反應體系中加入了顯色指示劑,陰陽性結果顯色差異顯著,擴增結束后可以通過觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結果,無需開蓋避免了擴增產物交叉感染性的可能性。恒溫熒光法是一種新型的恒溫核酸擴增技術,該技術無需常規PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設計要求,只需提供一個適宜的恒定溫度即可,因此,與常規PCR相比,恒溫熒光法技術更適合現場高通量快速檢測,具有簡單、快速、特異性強的特點。

二、環凱恒溫熒光法試劑盒特點

    快速簡便 將酶、引物等反應組分混勻后進行干粉化處理,增加試劑穩定性,使用時減少溶液配制步驟,更為便捷,整個檢測反應可在1 h內完成;

    判讀簡單 反應前加入顯色指示劑,反應后通過肉眼觀察反應液顏色變化或者經熒光監測儀器跟蹤熒光圖譜的變化判讀結果,直觀方便,且可有效避免反應后開蓋造成的氣溶膠污染。

    特異性高 利用靶基因序列上的多個獨立區域設計多條引物,保證擴增反應的高度特異性;

    靈敏度高 最低檢驗限達到18 CFU/Test;

恒溫熒光法檢測試劑盒

三、環凱恒溫熒光法試劑盒組成

    1)試劑盒組成

組分編號

組分名稱

規格×數量

DRL08

檢測試劑(凍干)

3排× 8管

FRL04

復溶液

650 μL × 1管

PRL08

陽性對照(凍干)

1管

SHR01

陰性對照(凍干)

1管

SHR02

裂解液

1 mL × 1管

SHR03

顯色指示劑

80 μL×1管

SHR04

超純水

1 mL×1管

 

說明書

1份


    2)檢測結果

四、環凱恒溫熒光法試劑盒操作流程

 

恒溫熒光法試劑盒

 

五、創傷弧菌快速篩選操作流程

恒溫熒光法檢測

六、需要配套的儀器及耗材列表

 

所需儀器

規格

備注

側邊過濾樣品均質袋

容量400ml,袋子規格190*300mm

采用過濾袋可顯著減少樣品殘渣,利于微生物的分離及DNA的提取。

可調移液器

1-10 μL、10-200 μL和100-1000 μL各一把

 

高速振蕩樣品前處理器

 ShockMixer-1;

均質頻率93次/s,相比拍擊均質器9次/s的均質頻率,高速振蕩樣品前處理器能產生高頻脈沖波,有更好的微生物釋放率;

更少的破袋率、更廣的樣品適用性:無需打碎樣品,不會導致樣品處理袋的破裂,樣品適用性更廣;

可預設均質時間(1-12分鐘)

固體食品樣品均質之用。

 

 

 

 

 

 

高速離心機

 最高轉速:16500

最大離心力(×g):18780

最大容量:12×10ml

控制及驅動系統:交流變頻電機,微機控制,直接驅動

 

恒溫金屬浴

溫度設定范圍:0℃~100℃

升溫時間:≤8min(室溫20℃~100℃)

降溫時間:≤8min(100℃~4℃)

溫度波動度:≤±0.1℃ 溫度均勻性:≤±0.5℃

 

 

 


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